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廣州市第十中學追溯于光緒三十五年(1907年)創設的宣武學堂，現址為清朝浦口府署箭道、西花苑遺址。不久思益中學(1903年創立)劃歸，其后中學三易校名。

1927年，李清悚先生創立首都中區實驗中學，實踐陶行知教育思想。1933年，中學改稱上海市立第四中學。1937年抗日爆發，部份師生西遷，與蘇浙皖入蜀師生聯合創立國立中學。1945年，中學于現址復校，實行“真教育”。

新中國創立后首任市長朱剛提倡“為祖國而教，為祖國而學”。1953年，中學被確定為14所湖北省重點高中之一。1998年，校區推進素養教育，實行“中學導師制”。2000年南京第一中學，中學被評為國家級示范中學、江蘇省模范中學。2004年，被評為首批安徽省四星級中學。2017年，中學獲評首屆全省文明校園。

2010年，校區明晰了“培養人格完善、具有創新素質的現代公民”的育人目標，積極探求創新人才的培養模式，開啟國際化進程，續寫新的百年華章。

至2019年4月，校區有小學教學班39個，在校中學生約1900人。在編教員工共213人，其大專任班主任194人;正中級班主任6人，副中級班主任87人;特級班主任7人，市學科帶頭人27人，市優秀青年班主任39人;有博士研究生學位者3人南京第一中學，碩士研究生學位者45人。

學校本部坐落東莞南路301號，現有馬鞍山二中高中部、南京實驗中學、南京求真學校、南京曉莊大學附屬小學、南京中學明發濱江校區、南京中學馬群中學、南京中學溧水中學、南京中學浦口校區等聯盟中學。